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乳铁蛋白

创建时间:2021/04/09 修改时间:2021/12/22 浏览:4346
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  • Item Name Joro spider toxin; lactoferrin; LF
  • 项目名称 乳铁蛋白
  • 其他名称 Joro spider toxin
  • 百书编码 wk.hyr.21.0011
  • 主编 Gary
  • CAS 112163-33-4
  • 化学式 C27H47N7O6
  • 结构式

  • 项目简介
    乳铁蛋白是一个80 kDa的铁结合糖蛋白,属于转铁蛋白家族 。乳铁蛋白在初乳和牛奶中含量高,在眼泪、唾液、精液、鼻和支气管分泌物、胆汁和胃肠液等粘膜分泌物中的含量较低。此外,乳铁蛋白也是中性粒细胞的组成成分 [1] 。
    1939年Sorensen等人在分离乳清蛋白时得到一种红色蛋白,Polis等人在分离Lp时也得到部分纯化的红色蛋白,但至1959年Groves用色谱得到纯的红色物质后,才确认这种红色物质是一种与铁结合的糖蛋白,称之为乳铁蛋白。乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能,被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。[1]
  • Major Test Method LC-MS
  • 主流测试方法

    目前,报道的乳铁蛋白的检测方法包括酶联免疫法、高效毛细管电泳法、生物传感测定法、高效液相色谱法、高效液相-质谱联用法等 。

    酶联免疫法
    酶联免疫法是一种基于抗原抗体特异性反应的检测方法,具有反应灵敏、特异性强等优点。在微孔板中包被抗乳铁蛋白抗体(一抗),加入目标物乳铁蛋白后,乳铁蛋白与一抗结合,再加入乳铁蛋白抗体(二抗)与之形成夹心结构,最后加入显色剂,利用酶标仪测定特定波长的吸光度值,其吸光度值与乳铁蛋白含量成正比,可绘制标准曲线达到定量检测样品中乳铁蛋白浓度的目的。酶联免疫法虽然灵敏度高,但通常需要进行多重的孵化、洗涤和清洗,操作较为繁琐,且所用抗体及抗抗体制备不易,价格昂贵,不适合用于大批量的样品分析 。

    高效毛细管电泳法
    样品分子扩散系数越小或分子量越大,毛细管柱的分离柱效越高。高效毛细管电泳法大多数使用石英材质的毛细管为分离通道,用高压直流电场作为驱动达到液相分离的目的,具有操作简单、灵敏度较高等优点,但需要解决毛细管壁对目标物质乳铁蛋白的吸附导致的重复性差的问题,且检测结果受样品复杂基质的影响较大 。

    表面等离子共振技术
    以临界角入射到不同折射率的两种金属介质界面的入射光线可以引起金属产生自由的电子共振,电子吸收光能量使反射光大幅减弱,能够使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为SPR角。SPR角随介质表面折射率变化而变化,而折射率的变化又与介质表面结合的分子质量成正比,因此可以通过对生物反应过程中SPR角的动态变化获取生物分子之间相互作用的特异信号达到检测的目的。基于表面等离子体共振技术的生物传感免疫测定法,无需进行标记便可实时,自动检测低含量乳铁蛋白,但实验温度及样品组成影响测定结果,仪器设备造价也较为昂贵

    高效液相色谱法
    高效液相色谱法(HPLC)是利用不同的色谱柱对不同组分因分配系数及吸附力大小的不同而被分离,并被检测器识别的技术,其中由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系的反相高效色谱是HPLC中应用最为广泛的一种液相色谱法,优点是反应灵敏、结果准确可靠、重复性好,但缺点是对样品的纯度要求较高,往往需要经过复杂的前处理过程才能进样。

    高效液相-质谱联用法
    质谱仪通过测量特定离子的质核比来对待测物进行准确定性,通常与高效液相色谱或气相色谱仪等联用来达到精确定量的目的。由于蛋白质分子质量太大,在对蛋白质的分析中,通常将其利用各种手段如胰蛋白酶水解为肽段的混合物,再通过对其中的特异性肽段的测定来检测该蛋白。有报道称研究人员将蛋白质组学技术、同位素标记技术与高效液相色谱-质谱法相结合来检测乳制品中的乳铁蛋白。液相质谱法结果灵敏可靠、重复性高、回收率高,但是需要将蛋白质大分子打碎成氨基酸小分子,通过特定的氨基酸片段来进行定性和定量,此时蛋白质已经变形,不利于待测样品中对于乳铁蛋白是否有活性的判断,且设备昂贵,对操作人员的专业性要求更高 。[1]

  • 用途 /
  • use /
  • 来源

    乳铁蛋白广泛分布于人和哺乳动物乳汁和其他多种组织及其分泌液中(包括泪液、精液、胆汁、滑膜液等内、外分泌液和嗜中性粒细胞),但乳汁中含量较高,其中牛初乳中乳铁蛋白含量最高。血液中乳铁蛋白主要由多核细胞分泌,骨髓、唾液腺及子宫内膜等也能分泌少量乳铁蛋白 [5] 。

    人乳中乳铁蛋白浓度约为1.0-3.0mg/ml,是牛乳中的10倍(牛乳中含量为0.02-0.35mg/ml),占普通母乳总蛋白的20%,在泌乳期间,乳铁蛋白含量随着泌乳时间的不同而发生变化,如人初乳中乳铁蛋白可达6-14mg/ml,常乳期降至1mg/ml。母牛产后第一天初乳中的乳铁蛋白含量可达1mg/mL。当奶牛牛奶中乳铁蛋白在泌乳末期的含量又会上升

  • source /
  • 法规要求 /
  • Regulatory requirements /
  • 参考文献
    [1] 百度百科 https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E9%93%81%E8%9B%8B%E7%99%BD/3407131?fr=aladdin
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